JVI | 基于M13噬菌体体外合成“零外源序列”、具备完整生物学功能的乙肝病毒cccDNA
乙型肝炎病毒(HBV)慢性感染及所致肝病长期严重危害健康,全球有约近3亿人长期感染HBV。在HBV复制的生命周期中,共价闭合环状DNA(cccDNA)作为病毒RNA转录的原始模板,在肝细胞核内以极低的拷贝数长期持续存在。它与宿主组蛋白等结合形成微染色体(Minichromosome)形式,其是现有药物手段难以直接靶向清除、乙肝无法彻底治愈的“元凶”。长期以来,由于自然感染样本中 cccDNA 拷贝数极低,且cccDNA结构十分精巧,尚缺乏能够完全模拟天然序列和功能状态的体外重组模型,这也阻碍了对cccDNA分子特征及调控干预的深入研究。如何高效构建出具有完整病毒序列、具备真实微染色体功能活性的cccDNA 模型,是领域一大关键难题。